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解决方案

无菌均质器获取单个组织细胞的解决方案

发布时间:2019-09-20 12:12:14点击量:182

无菌均质器获取单个组织细胞的方法:


将手术中切取的肿瘤组织(如胃癌、大肠癌、乳腺癌等)放在无菌培养皿中,用含有庆大霉素100U/ML的生理盐水洗涤,去除组织上黏附的细菌,清洗三遍后按2g重量10ml生理盐水的比例,用消毒过的剪刀将组织剪成小块,组织剪成2-5mm见方尽可能剪小,一起装入汗诺无菌均质袋中。

选用均质器汗诺HN-08HN-12N型拍打式均质器,设置拍击次数7/秒,工作时间5-10分钟,每分钟停1分钟,计算累计工作时间,不同组织的工作时间稍有不同。

再将经均质器处理后组织混合物吸入试管中,静置3-5分钟,取澄清的部分组织细胞悬浊液,内含有大量单个分散细胞,用小型离心机1000/分钟 离心5分钟,加入含20%小牛血清培养液,可以直接培养,细胞数可以调节在2*10⁴ ml左右,总细胞数随组织大小可以有变化,但培养用细胞足够多。

观察到单个圆形细胞为所需要的被分散的单细胞,包括腺体细胞以及上皮类细胞,不规则梭形细胞为打散的肌纤维细胞,也是分散的单细胞。都有完整圆润的细胞形态,活性好。



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